Karya Tulis Ilmiah ini membahas kebiasaan mahasiswa dalam menggunakan dan mengganti sarung tangan di Klinik Akademi Kesehatan Gigi Puskesad. Penelitian ini adalah penelitian deskriptif dengan menggunakan cara observasi, sedangkan pengambilan sampel dilakukan dengan metode total sampling. Objek penelitian adalah mahasiswa tingkat II Akademi Kesehatan Gigi Puskesad yang berjumlah 43 mahasiswa. Hasil penelitian ini menunjukan bahwa mahasiswa perempuan lebih disiplin dalam menggunakan dan mengganti sarung tangan. Sedangkan mahasiswa laki- laki belum maksimal dalam menggunakan dan mengganti sarung tangan dibandingkan dengan mahasiswa perempuan. Diharapkan terjadi peningkatan kepatuhan kebiasaan mahasiswa dalam menggunakan dan mengganti sarung tangan kedepannya, dapat di perhatikan kembali sesuai dengan prosedur pada saat bekerja di klinik guna mencegah dan melindungi sumber penularan infeksi silang kepada pasien dan antar petugas kesehatan lainnya.